同一年，atv，他们使用CRISPR技术使猪基因组内62个PERV基因同时失活。这在当时被认为是通过CRISPR实现精确、广泛遗传改变最成功的例子。它也为人们带了希望：这一技术最终可让猪器官适合于人体。

eGenesis公司2015年的研究成果属于细胞水平的试验。而现在，通过基因编辑工具CRISPR，eGenesis公司使猪胚胎中该病毒的25个拷贝全部失活，将这些胚胎植入母猪的体内后，健康小猪顺利诞生。目前，该公司已经通过这种方法获得了37只小猪，在4个月的观察中，这些小猪均发育正常且体内无病毒（活性）。

来自德国罗伯特·科赫研究所（Robert Koch Institute）研究所的病毒学家Joachim Denner一直在从事神秘的PERV测序相关研究，他表示：“如果这个消息属实，这将无疑具有极其重要的意义……但凡有可能敲除猪基因中的PERV病毒，我们应该毫不犹豫！”

图丨eGenesis公司进行研发的策略

传统的基因编辑过程非常缓慢且漫长，敲除一个基因的两个拷贝常常需要几代猪的繁殖，如果需要加入人类基因，那么时间可能还要X2。来自马里兰大学医学院的外科教授Muhammad Mohiuddin认为，与传统的基因编辑相比，使用CRISPR技术同时对多个基因进行剪切可以节省大量的时间。他同时也是另一个异种器官移植项目的负责人（并未参与此项研究）。

值得注意的是，虽然这些病毒可能会感染人类组织，但目前并没有证据证明这会导致人类的健康问题。

“除了这些病毒，异种器官移植在临床应用上还有其他一些限制因素”， Mohiuddin说到，话意直指在动物器官移植过程中机体产生的免疫反应。杨璐菡也认为，要想这些基因编辑猪的器官在人体上试用，开奖，仍旧需要数年的等待。

也就是说，猪器官人体移植目前面临的两大问题分别是：一是猪的基因组内含有内源性逆转率病毒序列，可以感染人类；二是猪的器官在人体内会触发严重的免疫风暴，产生免疫排斥反应。

解决了前一个问题，后一个问题将是eGenesis公司需要攻克的下一个难关。接下来，eGenesis将继续使用CRISPR技术对免疫系统相关基因进行修饰。

图丨CRISPR-Cas9技术有望解决猪器官进行异种移植时面临的挑战

随着技术的突破，还有一个问题也逐渐浮现出来：这种技术上的重大跨越反而使得人们对异种器官移植心生恐惧。由于PERV病毒风险的不确定性，有人担心过度的编辑将会使得原有的器官发育过程变得更加复杂，而且美国FDA已经明确要求，在未来的人体实验中也必须使用无PERV病毒的猪。

阿拉巴马大学伯明翰分校的移植免疫学家大卫·库珀（David Cooper）说：“很显然，这些尚未解决的问题使得猪器官移植的道路变得更加的崎岖。”

-End-