那么NgAgo引起的基因表达下调是一种普遍现象吗？作者分别测试了另外4个基因：ta, kdrl, lama1和flt1，用NgAgo和靶向这些基因的gRNA注射胚胎后，惊讶地发现四种情况都能看到基因表达下降。然而通过桑格测序，作者没有看到NgAgo引起ta基因的突变（基因编辑）。

　　韩春雨实验室报道的NgAgo的基因编辑作用是在37摄氏度的人类细胞中发生的，而斑马鱼的胚胎发育是在28.5摄氏度，那么NgAgo的基因编辑活性是否与温度有关呢？作者测试了在37度培养斑马鱼胚胎，发现NgAgo并不能引起fabp11a和ta发生基因突变（基因编辑）。更有趣的是，作者构建了三个根据结构域预测的NgAgo酶活性失活的突变体，针对fabp11a基因，发现它们仍然能够在斑马鱼胚胎中引起和野生型NgAgo效果相当的眼睛发育突变。经过测序检测，NgAgo失活突变体也不能在fabp11a基因上引起突变（基因编辑）。

　　进一步，作者发现用传统的morpholino介导的基因敲减技术去敲低fabp11a，能产生和NgAgo类似的表型和略低于NgAgo的效率。而用现在最流行的CRISPR／Cas9基因编辑技术，在fabp11a基因上能得到高效的基因编辑，以及类似NgAgo引起的表型 。

　　最后，作者用去除了NgAgo可能活性位点的突变体做实验，依旧可以观察到基因敲低现象，作者猜测NgAgo是通过结合到目标基因上阻止基因转录，从而引起基因表达的降低，而不是通过基因编辑发挥基因敲低的作用。但是作者没有进一步的实验证据证明这一点。有意思的是，据《澎湃新闻》报道，北京大学孙育杰实验室发现，用NgAgo去做基因位点标记时，通过光学成像他们发现用NgAgo无法标示出端粒。孙育杰等据此认为NgAgo未必有结合和打开双链DNA的能力。因此NgAgo究竟是怎样发挥基因敲低的功能，还需要进一步研究。

　　文章的通讯作者是江苏南通大学神经再生重点实验室副教授刘东，从事斑马鱼的血管生成研究。《细胞研究》由中科院上海生化与细胞生物学研究所主办，是目前国内影响因子最高的英文学术期刊。

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