点击标题下「蓝色微信名」可快速关注作者：刘杨 张泓对支原体的研究始于人类探索家畜传染性疾病的病原，1898年法国Nocard及Roux用含动物血清的人工培养基从患牛肺疫的病灶中首次分离，当时命名为胸膜肺炎微生物(Pleuopneumonia organism，PPO)。随后在各地区不同类型动物标本中分离出同类微生物，因形态及培养特性与PPO相似，逐又统称为类胸膜肺炎微生物(Pleuopneumonia like organism，PPLO)。在之后的50年间，越来越多的证据表明，PPLO与许多动物疾病有关，并可能引起人类疾病。随着核苷酸测定以及DNA杂交技术的发展，最终认识到PPLO的确是一种独特的生命形式，在所有环境下均缺乏形成细胞壁的能力，与细菌L型完全不同。1956年正式被命名为支原体(Mycoplasma)，并在微生物分类中建立了一个独立的新纲——柔膜体纲(Mollicutes)。目前证明对人有致病作用的支原体有肺炎支原体、脲原体属、人型支原体、生殖支原体和发酵支原体等5种(表1)[1]。

　　肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae，MP)是目前人类致病支原体中研究最多、较为了解的一种。1944年Eaton自原发性非典型肺炎患者呼吸道分泌物中分离出一种致病因子，给地鼠接种后可引起肺炎，给健康志愿者接种后可产生非典型肺炎症状，该病原体能通过细菌滤器，故被考虑为一种病毒，称Eaton因子。20世纪50年代和60年代早期在一些健康志愿者中进行的试验证明，Eaton因子确实能够引起人类下呼吸道感染，但当时依然认为该病原体可能为某种病毒。1961年有学者提出Eaton因子是一种PPLO而并非病毒，并于1962年用无细胞的人工培养基从非典型肺炎患者痰液中分离Eaton因子获得成功，从而证明其为一种PPLO而非病毒，并命名为肺炎支原体[1,2,3,4]。一、微生物学特征

　　无论就细胞直径或基因组大小而言，支原体都是能够进行自本港台直播复制的、有能力在体外不依靠活体细胞而生存的最小微生物。因无细胞壁，肺炎支原体呈多形性，多为纺锤体状，长约1～2 μm，宽约0.1～0.2 μm，其细胞体积往往小于典型细菌的5%。细胞极小的体积允许MP通过0.45孔径的细菌滤器。如此之小的细胞形态即使在低倍显微镜下也无法清晰的观察到，而且它们的生长繁殖不会引起液体培养基的混浊。在营养丰富的固体培养基(如SP4培养基)上生长时，通过高倍显微镜才能够看到MP的典型菌落，其直径可大于100 μm[1,2]。

　　1996年完成MP基因组测序。MP基因组共有687个基因，全长816 394 bp[5]。而大肠埃希菌的基因组全长4 600 000 bp，比MP长近5倍。MP未发现氨基酸合成的基因，同时也缺乏合成复杂细胞壁结构的基因，涉及DNA修复、DNA重组、细胞分裂及蛋白分泌的基因数量也比复杂细菌少。MP较小的基因组长度以及有限的生物合成能力限制了它的生物合成和代谢能力，导致需要非常复杂的培养基添加成分才能在体外进行分离培养。胆固醇是支原体三层细胞膜的重要结构，而支原体本身没有合成能力。因此在进行支原体培养时，必须在体外人工培养基中添加人或动物血清以提供胆固醇成分。MP能够发酵葡萄糖，可通过糖酵解途径进行分解代谢，产生乳酸、丙酮酸或ATP。MP缺少细胞壁，对于干燥非常敏感，在固体培养过程中应该采用适当措施保持培养环境湿润[1]。MP以二元分裂方式繁殖，在玻璃或其开奖直播固体表面以滑行方式进行运动。基因组分析及电镜下观察均未提示菌毛或鞭毛等类似结构存在，因此上述滑行运动方式考虑可能与黏附细胞器作用有关，但具体机制不清[6]。

　　二、致病性

　　MP仅寄生在人类中，为黏膜病原体，在宿主呼吸道黏膜上皮细胞内寄生。MP的丝状体顶端有特殊结构，结构中可见透明腔中围绕着一个浓厚的核状中心，为其黏附于宿主呼吸道上皮细胞的结合点。顶端结构目前被认为是MP与宿主相互作用的最主要结构。MP侵入呼吸道后，借滑行运动定位于纤毛毡的隐窝内，以其顶端结构牢固地黏附于上皮细胞表面的受体，能抵抗黏膜纤毛的清除和吞噬细胞的吞噬，并继而产生一系列细胞毒性作用。MP主要黏附因子是对胰蛋白酶敏感的大分子表面蛋白，称为P1蛋白。P1蛋白相对分子质量约为170 000，是一种膜表面蛋白，主要聚集在MP外膜顶端结构中，呈簇状排列，可介导MP黏附到呼吸道上皮细胞表面[7,8,9,10,11,12,13,14]，这种黏附是MP繁殖和致病的先决条件。有学者研究发现仅有P1蛋白表达并不足以介导MP与宿主黏附并致病，还需要其开奖直播如P30、高分子量蛋白(high molecular weight protein, HMW)等共同作用[15,16,17]。近期研究显示MP细胞表面存在两种蛋白，分别为延长因子TU和丙酮酸脱氢酶E1β，有助于MP与纤维连接蛋白结合[18]。

　　有关MP致病性的更多内容可参阅本期刊文"肺炎支原体感染的致病机制"。

　　三、分离培养